答：從符合計(jì)數(shù)范圍的稀釋度三個(gè)平行樣中任選五個(gè)做血漿凝固酶試驗(yàn)。

2、國(guó)標(biāo)GB4789.10-2016金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)中培養(yǎng)時(shí)間很多都改成了24-48h ，這個(gè)跨度有點(diǎn)大，具體怎么判定��？

答：如果培養(yǎng)24h后已經(jīng)長(zhǎng)菌就不需要再進(jìn)行培養(yǎng)了；如果培養(yǎng)24h后未長(zhǎng)菌則需要繼續(xù)培養(yǎng)至48h。

3、Baird-Parker培養(yǎng)基上，金黃色葡萄球菌和普通變形桿菌都是黑色菌落，有渾濁帶和最外透明帶，有的說(shuō)普通變形桿菌的渾濁帶比較大，可是培養(yǎng)基上很難判斷，那有沒(méi)有更好的判斷方式？

答：金葡：直徑約為0.5～1μm。平板上菌落呈金黃色，也有時(shí)為白色，大而突起、圓形、不透明、表面光滑，周?chē)�有溶血圈，而B(niǎo)aird－Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤(rùn)、直徑為2～3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周?chē)鸀橐换鞚釒�，在其外層有一透明圈；在BP上區(qū)分不出來(lái)，需要進(jìn)一步生化實(shí)驗(yàn)。

4、金黃色葡萄球菌定性檢驗(yàn)分離中，要求分別用BP平板跟血平板。可是到5.5確認(rèn)鑒定里面，在血漿凝固酶試驗(yàn)中，只需選其中一個(gè)就可以。
那么為什么不在分離這個(gè)步驟里就只使用BP平板呢。

答：一個(gè)看形態(tài)，一個(gè)看溶血，只有按照標(biāo)準(zhǔn)方法檢驗(yàn)的結(jié)果才有法律效力。

5、金黃色葡萄球菌第二法涂布法中，1ml接種到三塊平板是用一條玻璃涂布棒涂布就好還是同個(gè)樣品不同平板也要更換涂布棒涂布？

答：個(gè)人見(jiàn)解，一根就可以了，最后統(tǒng)計(jì)數(shù)量的時(shí)候，是計(jì)算三個(gè)板的總數(shù)。

6、Baird-Parker瓊脂配制中說(shuō)要冷卻至50°C的意思是高壓滅菌完放入50°C的恒溫水浴鍋嗎？

答：高壓滅菌出鍋后就制作BP平板，可以將熱培養(yǎng)基基礎(chǔ)進(jìn)行冷卻，加入增菌劑時(shí)保證基礎(chǔ)培養(yǎng)基的溫度不超過(guò)50攝氏度，不然可能影響增菌劑的效果。

7、每個(gè)稀釋度分別吸取1mL樣品勻液以0.3mL、0.3mL、0.4mL接種量分別加入三塊BP平板，以0.3mL、0.3mL、0.4mL接種量的作用是？如果同時(shí)在1ml的移液管中分別放入到三個(gè)平板中，當(dāng)剩下的0.4nl樣品液，存在的偏差是否對(duì)結(jié)果有影響？平板上是否應(yīng)該做好相對(duì)應(yīng)的標(biāo)識(shí)？

答：每板分?jǐn)偟囊毫�，便于涂布干�?; 三板共計(jì)1mL，用來(lái)計(jì)量。使用總則規(guī)定的經(jīng)檢校的吸量管，吸1mL分到三塊板上即可，先能夠按標(biāo)準(zhǔn)完成測(cè)定，量器誤差對(duì)不確定度的影響留待探討。不管測(cè)定啥項(xiàng)目，平板都要作清楚標(biāo)記。

8、無(wú)菌涂布棒是使用高壓濕熱滅菌還是可以按照接種環(huán)這樣進(jìn)行使用？

答:涂布捧，提前干熱、濕熱滅菌，現(xiàn)場(chǎng)灼燒滅菌，均可。購(gòu)買(mǎi)使用已經(jīng)滅菌的、一次性的涂布棒，也行。

9、如涂布過(guò)程中，觸及平板邊緣，出現(xiàn)的情況是菌落蔓延生長(zhǎng)嗎？

答：觸及邊緣，順邊緣擴(kuò)散生長(zhǎng)，無(wú)法像在平面上生長(zhǎng)那樣便于觀察計(jì)數(shù)。

10、BP平板的傾倒量是否有規(guī)定，還是以15-20mL的量為好？且BP平板是當(dāng)天檢驗(yàn)，當(dāng)天滅菌使用，不需進(jìn)行剔除試驗(yàn)是嗎？

答：就是通常平板澆注的用量。B.P.平板的制作、貯存，詳見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)和培養(yǎng)基說(shuō)明書(shū)。作好相關(guān)質(zhì)控。

11、如樣液未完全吸收，就翻轉(zhuǎn)平板，是容易掉落下來(lái)，還是會(huì)影響金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)？

答：有液體存在，長(zhǎng)出的菌落可能洇漫交疊不清晰，觀察計(jì)數(shù)困難。

12、分別做血漿凝固酶試驗(yàn)，如可疑還是需要挑取到營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面進(jìn)行鑒定是嗎？

答：血凝酶試驗(yàn)，按標(biāo)準(zhǔn)5.5.2步驟進(jìn)行。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，就要同時(shí)接種到BHI和NA斜面。先用BHI培養(yǎng)物鑒定，再用NA斜面培養(yǎng)后再次轉(zhuǎn)接到BHI的培養(yǎng)物重復(fù)鑒定。

13、同時(shí)劃線接種到血平板，是接種到一個(gè)平板便可？

答：一板劃成幾個(gè)區(qū)，接種幾個(gè)菌落，能充分生長(zhǎng)便于觀察就可以的。

14、計(jì)算公式中的A（某一稀釋度典型菌落的總數(shù)）是指8.4.2中的讀數(shù)吧？而B(niǎo)（某一稀釋度鑒定為陽(yáng)性的菌落數(shù)）是指血平板的菌落數(shù)嗎？

答：

A：是8.4.2數(shù)出來(lái)的典型總數(shù)。
B：是8.4.3挑取幾個(gè)菌落作鑒定試驗(yàn)里，被確認(rèn)陽(yáng)性的菌落數(shù)。如果挑5個(gè)，則B可能數(shù)值為0、1、2、3、4、5。
C：是8.4.3挑取作鑒定試驗(yàn)的菌落數(shù)。如果挑5個(gè)，則C為5。
B÷C，鑒定試驗(yàn)的陽(yáng)性比率。