成分:
絞碎牛肉(或牛心) 1000g
15%氫氧化鈉溶液 27mL
胰蛋白酶 40mL
三氯甲烷 1mL
氯化鈉 10g
蒸餾水 2000mL
制法:
1 稱取碎牛肉,加蒸餾水,隔水加熱到80℃,維持15min。
2 加氫氧化鈉溶液,對pH試紙呈弱堿性,冷至40℃。
3 加胰蛋白酶、氯仿,在36±1℃放置4~5h,每小時搖動一二次。
4 4h后,吸取上層液5mL于試管中,加5%硫酸銅溶液0.1mL、4%氫氧化鈉溶液5mL,混合之。若呈紅色,則不須再消化,可由溫箱取出。
5 加入15%乙酸溶液45mL,對pH試紙呈酸性。
6 煮沸15min,使胰蛋白酶破壞,冷后,放冰箱內(nèi)一夜。
7 次日吸取上層清液,加氯化鈉10g,并加水補足原量,煮沸。
8 校正pH7.4~7.6(加15%氫氧化鈉溶液約10mL),加熱,用濾紙過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌20min。
注:①此培養(yǎng)基可作為瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ),不需加蛋白胨。
②胰蛋白酶之配制:稱取去脂絞碎的豬胰500g,加入乙醇500mL、蒸餾水1500mL,混合之,裝人玻塞瓶內(nèi)。每日搖勻三次。3d后,用絨布過濾擠出其汁,加鹽酸至0.05%,放冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?br />
絞碎牛肉(或牛心) 1000g
15%氫氧化鈉溶液 27mL
胰蛋白酶 40mL
三氯甲烷 1mL
氯化鈉 10g
蒸餾水 2000mL
制法:
1 稱取碎牛肉,加蒸餾水,隔水加熱到80℃,維持15min。
2 加氫氧化鈉溶液,對pH試紙呈弱堿性,冷至40℃。
3 加胰蛋白酶、氯仿,在36±1℃放置4~5h,每小時搖動一二次。
4 4h后,吸取上層液5mL于試管中,加5%硫酸銅溶液0.1mL、4%氫氧化鈉溶液5mL,混合之。若呈紅色,則不須再消化,可由溫箱取出。
5 加入15%乙酸溶液45mL,對pH試紙呈酸性。
6 煮沸15min,使胰蛋白酶破壞,冷后,放冰箱內(nèi)一夜。
7 次日吸取上層清液,加氯化鈉10g,并加水補足原量,煮沸。
8 校正pH7.4~7.6(加15%氫氧化鈉溶液約10mL),加熱,用濾紙過濾,分裝燒瓶,121℃高壓滅菌20min。
注:①此培養(yǎng)基可作為瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ),不需加蛋白胨。
②胰蛋白酶之配制:稱取去脂絞碎的豬胰500g,加入乙醇500mL、蒸餾水1500mL,混合之,裝人玻塞瓶內(nèi)。每日搖勻三次。3d后,用絨布過濾擠出其汁,加鹽酸至0.05%,放冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?br />