食品伙伴網(wǎng)服務(wù)號(hào)

試劑、進(jìn)樣瓶、色譜柱等選擇不對(duì),對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響有多大

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-04-08
核心提示: 當(dāng)下,市面上實(shí)驗(yàn)室試劑和耗材琳瑯滿目,質(zhì)量、價(jià)格等也是參差不齊,究竟什么樣的試劑與耗材才是對(duì)保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無誤的
 當(dāng)下,市面上實(shí)驗(yàn)室試劑和耗材琳瑯滿目,質(zhì)量、價(jià)格等也是參差不齊,究竟什么樣的試劑與耗材才是對(duì)保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無誤的呢?作為實(shí)驗(yàn)人員又應(yīng)該如何選擇呢?
首先,就是方法的適用性,不同的實(shí)驗(yàn)方法,選擇不同的試劑與耗材,這是選擇的前提,其次,就要考慮質(zhì)量和價(jià)格,我們后說質(zhì)量與價(jià)格,不是說他們不重要,而這是一個(gè)先后的順序,三者同樣重要,少考慮了哪一樣都將是不明智的選擇。
化學(xué)試劑的選用


+

化學(xué)試劑是進(jìn)行化學(xué)研究、成分分析的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),是科技進(jìn)步的重要條件,廣泛用于物質(zhì)的合成、分離、定性和定量分析。在工廠、學(xué)校、醫(yī)院和研究所的日常工作中,都離不開化學(xué)試劑。
首先,我們要了解實(shí)驗(yàn)的化學(xué)試劑的分類。
國標(biāo)試劑分類介紹
該類試劑為我國國家標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定,適用于檢驗(yàn)、鑒定、檢測(cè)。
試劑級(jí)(RG,紅標(biāo)簽):作為試劑的標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)品。
基準(zhǔn)試劑(JZ,綠標(biāo)簽):作為基準(zhǔn)物質(zhì),標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液。
優(yōu)級(jí)純(GR,綠標(biāo)簽):主成分含量很高、純度很高,適用于精確分析和研究工作,有的可作為基準(zhǔn)物質(zhì)。
分析純(AR,紅標(biāo)簽):主成分含量很高、純度較高,干擾雜質(zhì)很低,適用于工業(yè)分析及化學(xué)實(shí)驗(yàn)。
化學(xué)純(CP,藍(lán)標(biāo)簽):主成分含量高、純度較高,存在干擾雜質(zhì),適用于化學(xué)實(shí)驗(yàn)和合成制備。
實(shí)驗(yàn)純(LR,黃標(biāo)簽):主成分含量高,純度較差,雜質(zhì)含量不做選擇,只適用于一般化學(xué)實(shí)驗(yàn)和合成制備。
教學(xué)試劑:可以滿足學(xué)生教學(xué)目的,不至于造成化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象偏差的一類試劑。
指定級(jí)(ZD):該類試劑是按照用戶要求的質(zhì)量控制指標(biāo),為特定用戶訂做的化學(xué)試劑。
高純?cè)噭‥P):包括超純、特純、高純、光譜純,配制標(biāo)準(zhǔn)溶液。此類試劑質(zhì)量注重的是在特定方法分析過程中可能引起分析結(jié)果偏差,并對(duì)成分分析或含量分析產(chǎn)生干擾的雜質(zhì)含量,但對(duì)主含量不做很高要求。
色譜純(GC):氣相色譜分析專用。質(zhì)量指標(biāo)注重干擾氣相色譜峰的雜質(zhì)。主成分含量高。
色譜純(LC):液相色譜分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。質(zhì)量指標(biāo)注重干擾液相色譜峰的雜質(zhì)。主成分含量高。
指示劑(ID):配制指示溶液用。質(zhì)量指標(biāo)為變色范圍和變色敏感程度。可替代CP,也適用于有機(jī)合成用。
生化試劑(BR):配制生物化學(xué)檢驗(yàn)試液和生化合成。質(zhì)量指標(biāo)注重生物活性雜質(zhì)。可替代指示劑,可用于有機(jī)合成。
生物染色劑(BS):配制微生物標(biāo)本染色液。質(zhì)量指標(biāo)注重生物活性雜質(zhì)?商娲甘緞,可用于有機(jī)合成。
光譜純(SP):用于光譜分析。分別適用于分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)品、原子吸收光譜標(biāo)準(zhǔn)品、原子發(fā)射光譜標(biāo)準(zhǔn)品。
合成試劑:就是在標(biāo)明成分主含量的前提下,嚴(yán)格給出該產(chǎn)品的有關(guān)各種物理常數(shù)的一類化學(xué)試劑。
其次,我們必須考慮試劑的具體用途。
化學(xué)試劑的選用應(yīng)以分析要求為主,包括分析任務(wù)、分析方法、對(duì)結(jié)果準(zhǔn)確等為依據(jù),來選用不同等級(jí)的試劑。如痕量分析要選用高純或優(yōu)級(jí)純?cè)噭,以降低空白值和避免雜質(zhì)干擾。在以大量酸堿進(jìn)行樣品處理時(shí),其酸堿也應(yīng)選擇優(yōu)級(jí)化學(xué)純。同時(shí),對(duì)所用的純水的制取方法和玻璃儀器的洗滌方式也應(yīng)有特殊要求。作仲裁分析也常選用優(yōu)級(jí)純、分析純?cè)噭。一般車間控制分析,選用分析純、化學(xué)純?cè)噭。某些制備?shí)驗(yàn)、冷卻浴或加熱的藥品,可選用工業(yè)品。
不同分析方法對(duì)試劑有不同要求。如絡(luò)合滴定,最好用分析純?cè)噭┖腿ルx子水,否則因試劑后水中的雜質(zhì)金屬離子封閉指示劑,使滴定終點(diǎn)難以觀察。
另一方面,GC-MS,HPLC,UPLC和 LC-MS等應(yīng)用,需要特定的或高度純化的溶劑級(jí)別,以滿足痕量分析的嚴(yán)格性能要求。這樣也保證用戶得到最高的儀器靈敏度,同時(shí)避免因使用低質(zhì)量溶劑導(dǎo)致儀器中有殘留引起的停機(jī)清洗。使用高質(zhì)量溶劑的好處還包括減少重復(fù)工作、提高精密度和準(zhǔn)確度、提高儀器性能、增加重現(xiàn)性以及減少儀器配件和提高分析效率等。盡管這些高純度溶劑的成本會(huì)比低級(jí)別的產(chǎn)品稍高,但這些成本可以從上述好處中得到抵消。
以下是幾種常見的實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑用途:
1、HPLC級(jí)高純液相色譜溶劑
優(yōu)點(diǎn):
  • 低紫外吸收
  • 非揮發(fā)性物質(zhì)、游離酸、游離堿和水份含量低
  • 可用于熒光檢測(cè)
用途:用于液相色譜(LC)樣品制備、LC樣品分析、LC-MS分析
2、農(nóng)殘級(jí)試劑
優(yōu)點(diǎn):
  • 極低的農(nóng)殘背景值(≤5 pg/ml ),不揮發(fā)性組分極少
  • GC控制(ECD-PND檢測(cè))質(zhì)量可靠,穩(wěn)定性高
  • 適用于分析有機(jī)氯農(nóng)藥、有機(jī)磷農(nóng)藥、多氯聯(lián)苯
  • (PCBs)及其他用GC/ECD和GC/PND檢測(cè)的化合物
  • 符合各種殺蟲劑殘留量分析的要求和對(duì)低揮發(fā)性雜質(zhì)的要求 
用途:用于氣相色譜檢測(cè)(ECD、PND),用于有機(jī)氯、有機(jī)磷農(nóng)藥,PCBs及其他用GC/ECD和GC/PND檢測(cè)的化合物。
3、光譜純?cè)噭?/span>
優(yōu)點(diǎn):
  • 低紫外吸收、低紅外吸收
  • 雜質(zhì)含量低
  • 適用于UV、IR光譜分析
用途:用于UV、IR光譜分析
4、優(yōu)級(jí)純?cè)噭?/span>
符合國際標(biāo)準(zhǔn)要求,金屬元素雜質(zhì)含量低(大多是ppm級(jí))。
用途:優(yōu)級(jí)純?cè)噭┛捎糜诖蠖鄶?shù)常規(guī)實(shí)驗(yàn),這類產(chǎn)品還可應(yīng)用于生產(chǎn)領(lǐng)域。
5、特純與合成試劑
特純(extra pure)或者合成(for synthesis)級(jí)別試劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能夠滿足實(shí)驗(yàn)室常規(guī)溶液的配置或標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)使用(藥物合成原材料等),通常只檢測(cè)一些重要應(yīng)用的參數(shù),比如,純度、IR參數(shù)、水分含量和醚含量以及過氧化物成分。
6、NMR核磁共振溶劑
氘代溶劑廣泛應(yīng)用于化學(xué)研究領(lǐng)域,對(duì)于分析有機(jī)物分子結(jié)構(gòu)的重要方法--核磁共振波譜法是不可缺少。
用途:核磁共振實(shí)驗(yàn)可以提供原子同其他分子中的原子的關(guān)聯(lián)信息,包括分子的空間取向、三維空間結(jié)構(gòu)。在蛋白質(zhì)組學(xué)、染色體組學(xué)、藥物研究領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。
對(duì)氘代溶劑有哪些要求?
NMR對(duì)所用溶劑的氘代度反應(yīng)很敏感,如用200兆赫光譜,使用氘代度在99.5%~99.8%就足夠了,如果提高設(shè)備的等級(jí),例如用600兆赫光譜,則需要更高氘代度的溶劑。
7、基準(zhǔn)試劑
基準(zhǔn)化合物必須是測(cè)試精度范圍內(nèi)的純物質(zhì);基準(zhǔn)溶液被用于檢驗(yàn)和校準(zhǔn)當(dāng)量溶液、pH緩沖溶液;只有這樣的物質(zhì)才能反映檢驗(yàn)測(cè)定當(dāng)量溶液。
8、衍生化試劑
衍生法指借助化學(xué)反應(yīng)將待測(cè)組份接上某種特定基團(tuán),從而改善其檢測(cè)靈敏度和分離效果的方法。利用化學(xué)衍生反應(yīng)達(dá)到改變化合物特性的目的,使其更適合于特定分析的過程,在儀器分析中被廣泛應(yīng)用。
氣相色譜用:為了增加樣品的揮發(fā)度或提高檢測(cè)靈敏度;
高效液相色譜用:與樣品組份進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),反應(yīng)的產(chǎn)物有利于色譜檢測(cè)或分離。
紫外光譜用:使被測(cè)化合物帶上特定基團(tuán),具有紫外吸收。
紅外光譜用:使被測(cè)化合物鍵合特定基團(tuán),具有紅外吸收。
熒光檢測(cè)用:帶上熒光發(fā)色基團(tuán)。
最后,綜合考量質(zhì)量與價(jià)格。
雖然化學(xué)試劑必須按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)合格后才能出廠銷售,但不同廠家原料和工業(yè)生產(chǎn)的試劑在性能上有時(shí)有顯著差異。甚至同一廠家,不同的同一類試劑,其性質(zhì)也很難完全一致,因此,在某些要求較高的分析中,不僅要考慮試劑的等級(jí),還應(yīng)注意生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批號(hào)等。
說完了實(shí)驗(yàn)室試劑的選取辦法,接下來咱們?cè)倭囊涣娜绾芜x取實(shí)驗(yàn)室耗材,因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室耗材眾多,只選取其中幾個(gè)常見的實(shí)驗(yàn)室耗材。
固相萃取柱的選擇


+
關(guān)于萃取柱使用時(shí)的常見問題,一般有回收率低、重現(xiàn)性差、凈化效果不佳、流速過快過慢這幾大方面,下面我們一一說明:

1、回收率低
原因分析:
(1)目標(biāo)物在填料上保留不足
判斷方法:空白溶劑加標(biāo),回收上樣液和淋洗液,若實(shí)際檢測(cè)濃度超過含量的5%,說明保留不足。
可能原因
對(duì)策
SPE柱選擇不合適
選擇更強(qiáng)保留的SPE柱
樣品上樣液或淋洗液的洗脫強(qiáng)度過強(qiáng)
降低樣品上樣液或者淋洗液的洗脫強(qiáng)度
上樣體積/濃度過高,導(dǎo)致過載發(fā)生
減少上樣濃度或者增加填料量
操作過程中,小柱發(fā)生“干涸”現(xiàn)象
重新進(jìn)行活化/平衡,保證小柱在淋洗結(jié)束前不能發(fā)生“干涸”現(xiàn)象

(2)目標(biāo)洗脫不完全
判斷方法:空白溶劑加標(biāo),回收上樣液和淋洗液,沒有檢出目標(biāo)物;但回收洗脫液,回收率也不高。

可能原因
對(duì)策
小柱保留太強(qiáng)
選擇保留稍弱的SPE柱
洗脫能力太強(qiáng)
增強(qiáng)洗脫強(qiáng)度
洗脫體積太小
增強(qiáng)洗脫體積

(3)其他原因
判斷方法:空白溶劑加標(biāo),回收上樣液,淋洗液沒有檢出目標(biāo)物;回收洗脫液,回收率正常。

可能原因
對(duì)策
預(yù)處理的提取不足
改變提取溶劑
目標(biāo)物質(zhì)不穩(wěn)定,揮發(fā)或者分解
改變提取和轉(zhuǎn)移方式,減少加熱溫度,受PH影響較大的化合物可加入緩沖鹽調(diào)節(jié)PH等
預(yù)處理過程復(fù)雜
簡(jiǎn)化預(yù)處理過程
目標(biāo)物與雜質(zhì)結(jié)合
換適當(dāng)?shù)姆椒ǔs質(zhì)
雜質(zhì)干擾效應(yīng)太強(qiáng)
改變前處理方法或與基質(zhì)加標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行對(duì)比
雜質(zhì)過多,超出小柱最高保留
改變預(yù)處理方法,減少上樣量或增加小柱填料量

2、重現(xiàn)性差的原因及對(duì)策
可能原因
對(duì)策
操作步驟繁瑣,人為誤差導(dǎo)致
改變前處理方法或者制定SOP方法
復(fù)雜樣品基質(zhì)除雜效果不佳
改變整個(gè)前處理方法,加入內(nèi)標(biāo)或與基質(zhì)加標(biāo)數(shù)據(jù)做對(duì)比
上樣過程發(fā)生干涸
重新活化平衡
發(fā)生堵柱現(xiàn)象或者流速過快
前者改變預(yù)處理方法,后者使用止回閥控制流速

3、凈化效果不佳的對(duì)策

①改變預(yù)處理方法
②改變淋洗液和洗脫液的強(qiáng)度
③選擇合適的作用小柱
④正確進(jìn)行SPE操作
4、流速過快過慢的原因及對(duì)策

流速過慢的原因
對(duì)策
SPE選擇的粒徑過小
選擇大粒徑SPE
樣品預(yù)處理后仍有懸浮不溶物
上樣前冷凍離心
樣品粘度太高
樣品稀釋
SPE阻力過大,液體無法靠重力滴落
使用手動(dòng)固相萃取柱裝置,通過調(diào)節(jié)止回閥,氣門,抽負(fù)壓來調(diào)節(jié)流速
流速過快的原因
對(duì)策
SPE選擇的粒徑過大
選擇小粒徑的SPE
重力作用時(shí)流速依然很快
使用手動(dòng)SPE裝置,調(diào)節(jié)止回閥
抽負(fù)壓時(shí)流速過快
調(diào)節(jié)止回閥和氣門,控制真空表壓力恒定在一定范圍內(nèi)

所以,選擇合適的萃取柱對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性有著至關(guān)重要的作用。一般從兩方面進(jìn)行考量:吸附劑和柱規(guī)格。適宜的吸附填料可以讓干擾物質(zhì)與目標(biāo)組分得到良好的分離,并滿足回收要求。而吸附劑所能吸附的化合物質(zhì)量是有限的,一旦樣品量過大,則會(huì)出現(xiàn)“超載”,使得目標(biāo)物直接“穿透”萃取柱不被保留。
圖片

根據(jù)基質(zhì)性質(zhì)選擇
吸附劑主要可根據(jù)目標(biāo)化合物性質(zhì)和基質(zhì)性質(zhì)進(jìn)行選擇。
吸附劑的選擇則大致可由以上兩種方式進(jìn)行選擇,對(duì)于具體實(shí)例,可依據(jù)“區(qū)分目標(biāo)化合物和主要干擾物”的原則進(jìn)行選擇。
基質(zhì)
目標(biāo)化合物
主要干擾物
萃取柱
土壤、污水
疏水性有機(jī)污染物
腐殖物質(zhì)
反相柱C18、SLC
水果、蔬菜、中藥、果汁、蔬菜汁、果酒
多種農(nóng)藥殘留
碳水化合物、色素、有機(jī)酸、酚
NH2、Carbon/NH2
弱極性農(nóng)藥
反相柱C18


堿性農(nóng)藥
陽離子交換柱HLB


酸性農(nóng)藥
陰離子交換住PAX


血液、尿液、動(dòng)物組織、奶制品
中性、弱酸性、弱堿性藥物
蛋白質(zhì)、脂肪
反相柱C18、SLC
堿性藥物
陽離子交換柱PCX


酸性藥物
陰離子交換住PAX


油脂
脂溶性維生素、磷脂、黃曲霉毒素
脂肪
正相柱silica、NH2、PSA

選擇出適宜的吸附劑后,還需要根據(jù)檢定所需的樣品量選擇合適的柱規(guī)格。由于萃取柱的吸附劑能吸附的化合物質(zhì)量是有限的,一旦超過了這個(gè)數(shù)值,目標(biāo)物就不能被有效保留,使得洗脫效果大打折扣。因此,根據(jù)樣品中的組份量選擇合適的柱規(guī)格,是很有必要的。
以下給出了萃取柱的上樣容量及洗脫參數(shù),以供參考:
萃取柱規(guī)格
最大上樣量
最小洗脫體積
50mg
2.5mg
125μL
100mg
5mg
250μL
150mg
7.5mg
375μL
200mg
10mg
500μL
500mg
25mg
1250μL
1000mg
50mg
2500μL

液相色譜柱的選擇


+

選擇色譜柱時(shí)應(yīng)考慮不同色譜柱參數(shù)的影響,以下內(nèi)容對(duì)色譜柱的參數(shù)進(jìn)行分析。
HPLC色譜分離模式的選擇

在建立化合物的HPLC方法時(shí),可以首先根據(jù)化合物的分子量大小,極性大小及PKa,選擇合適的分離模式,在適當(dāng)?shù)姆蛛x模式下去再去優(yōu)化同類的色譜柱及流動(dòng)相;衔锓肿恿<2000Da時(shí),按下圖來選擇。

圖片
化合物分子量>2000Da時(shí):
圖片

在實(shí)際工作中所涉及的化合物絕大部分都可以使用反相色譜進(jìn)行分離,下面先分析反相鍵合相色譜柱性能的影響因素,只有了解影響色譜柱性能的因素,才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達(dá)到的分析效果及實(shí)驗(yàn)室條件來選擇適合的色譜柱。

影響色譜柱性能的物理參數(shù)

1、硅膠純度
硅膠純度和殘留金屬離子濃度,硅膠的雜質(zhì)會(huì)影響化合物的峰形,硅膠表面的金屬含量高會(huì)影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾。

2、色譜柱尺寸
填料床的長(zhǎng)度和內(nèi)徑,增加色譜柱長(zhǎng)度,可以在一定程度上提高柱效,但也會(huì)升高壓力和導(dǎo)致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會(huì)增加橫向擴(kuò)散,同樣會(huì)導(dǎo)致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑,可減少橫向擴(kuò)散,但壓力較大,對(duì)系統(tǒng)要求較高。

3、顆粒形狀及粒徑
球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結(jié)構(gòu)均勻,不規(guī)則形柱床結(jié)構(gòu)不均勻、流動(dòng)相線速度不均勻,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。

4、顆粒表面積
顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,以m2/g表示,相對(duì)而言高表面積對(duì)樣品具有較強(qiáng)的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達(dá)到平衡狀態(tài),更適合梯度洗脫程序。

5、孔徑
顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍是80~3000,大孔徑的填料顆?梢匝娱L(zhǎng)大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時(shí)間,改善分離,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動(dòng)力體積較大的分子。
圖片
影響色譜柱性能的化學(xué)因素
1、鍵合類型及鍵合相
鍵合相分子與基體單點(diǎn)相連為單體鍵合,這種鍵合方式可以提高傳質(zhì)速率,縮短柱平衡時(shí)間;聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點(diǎn)相連,這種鍵合方式可以增加色譜柱穩(wěn)定性,增加載樣量。而鍵合相不同會(huì)直接影響化合物的保留行為。

2、碳覆蓋率
高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現(xiàn)性,但分析時(shí)間長(zhǎng)。

3、封端
硅膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留硅羥基,如圖封端可以減輕待測(cè)組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng),改善保留和峰行,這對(duì)于堿性化合物尤其重要。而不同的封端技術(shù)也會(huì)直接影響色譜柱的效能。

圖片
反相鍵合相色譜柱的選擇
1、重現(xiàn)國標(biāo)文獻(xiàn)中方法
選擇色譜柱粒徑、比表面積、基質(zhì)表面特性、鍵合類型等相似的色譜柱,或者利用USP網(wǎng)站及一些色譜柱選擇軟件,如“column selector for acd/chemsketch”來查詢相似系數(shù),選擇相似系數(shù)高的色譜柱。
2、建立新化合物分離分析方法的色譜柱選擇
根據(jù)目標(biāo)分析物的分子量大小、溶解性、Pka值,以及分離要求、儀器、成本等各方面來選擇色譜柱。
(1) 根據(jù)分離目的選色譜柱,對(duì)映體分離常選擇手性柱,離子化色譜可選擇離子柱,蛋白多肽、DNA可選擇凝膠柱或離子交換柱,一般的小分子化合物可選擇普通反相柱,如C18、C8柱、苯基柱等等。
(2) 根據(jù)實(shí)際需求和設(shè)備選擇填料粒徑,普通HPLC一般選擇5μm或3.5μm粒徑的色譜柱,而UPLC則常使用1.7μm—3.5μm的色譜柱。
(3) 比表面積,高比表面積有助于分離,低比表面積更適合梯度洗脫程序。
(4) 孔徑,大分子化合物適合大孔徑,在保證比表面積的前提下,選擇孔徑大的。
(5) 鍵合相的選擇
  • 直鏈烷基鍵合相C18和C8適合中等極性化合物,對(duì)于極性化合物可以選用硅羥基未封端或特殊封端的C18柱;或者鍵入極性基團(tuán)的C18柱;

圖片

下表是常見的化學(xué)鍵合相及其運(yùn)用范圍:
現(xiàn)在商品化的液相色譜柱琳瑯滿目,根據(jù)色譜柱的參數(shù)可以給我們提供一個(gè)初步的選擇,但由于各個(gè)儀器廠商的填料技術(shù)和鍵合技術(shù)都有差異,即使是C18柱,同一品牌不同系列都有不同的功能,有能耐受低PH值的、耐受高溫、耐受純水相和適合堿性分離等等。所以在使用色譜柱之前需要好好閱讀產(chǎn)品說明手冊(cè),才能找到滿意的分離條件。

圖片
樣品瓶和隔墊的選擇


+



樣品瓶質(zhì)量的重要性
如果不嚴(yán)格控制公差,自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶的標(biāo)示尺寸及壁重可能有所不同,這會(huì)影響樣品瓶中的樣品容積,龍其對(duì)少量樣品來說非常重要,我們嚴(yán)格的公差控制貫穿于整個(gè)制造過程中,從最初設(shè)計(jì)到最后的光電掃描檢查過程,確保每一個(gè)樣品瓶和瓶蓋規(guī)格的準(zhǔn)確性。
在自動(dòng)進(jìn)樣器上使用劣質(zhì)樣品瓶和密封件的害處:

常見問題
影響
樣品瓶底部厚度不一致
抽取樣品不一致;損壞注射針頭
自動(dòng)進(jìn)樣器序列停止
錯(cuò)抓或掉了樣品瓶;珍貴樣品的損失
密封泄露檢測(cè)不到
樣品損失、揮發(fā);可能污染樣品
移位或定位不準(zhǔn)的隔墊
樣品損失;樣品污染
鬼峰
瓶蓋隔墊的污染

隔墊質(zhì)量的重要性
防了防止污染,避免針頭和儀器損壞,正確的隔墊選擇是至關(guān)重要的,在選擇時(shí)應(yīng)該注意的問題:
1、溫度控制
在較高溫度下隔墊會(huì)發(fā)生降解而導(dǎo)致樣品污染,橡膠隔墊僅在90℃以下穩(wěn)定,因此不適用于高溫應(yīng)用。通常以聚四氟乙烯和優(yōu)質(zhì)硅橡膠或者超純硅膠作為材料的隔墊是用于各種溫度的最佳選擇。
2、碎屑
當(dāng)針頭直徑相對(duì)隔墊太大或隔墊材料不能承受多次進(jìn)樣時(shí)就會(huì)產(chǎn)生碎屑,此時(shí),隔墊材料會(huì)脫落進(jìn)入樣品瓶并污染樣品。以下是如何防止碎屑的方法:
a. 選擇一種PTFE內(nèi)襯的隔墊以防止隔墊材料進(jìn)入樣品中;
b. 確保針頭未損壞,考慮使用側(cè)孔針頭替代錐形針頭;
c. 使用預(yù)穿孔隔墊幾乎可以完全消除碎屑。
d.  對(duì)于高敏感性樣品,推薦使用聚四氟乙烯(PTFE)隔墊,因?yàn)镻TFE層可作為一種耐化學(xué)腐蝕的屏障。
3、再密封性
再密封性是選擇隔墊需考慮的一個(gè)重要因素。PTFE/紅色橡膠隔墊不推薦用于多次進(jìn)樣或需要儲(chǔ)存用于以后分析的樣品。當(dāng)進(jìn)樣之間需要較長(zhǎng)時(shí)間或添加任何類型的標(biāo)樣時(shí),PTFE/硅橡膠/PTFE總是最佳選擇。
4、易刺穿性
通常,硅橡膠隔墊比紅色橡膠和丁基橡膠隔墊更易穿刺。預(yù)穿孔隔墊是最佳選擇,最易穿刺并能減少碎屑的可能。
5、瓶蓋和隔墊兼容性
瓶蓋和隔墊兼容性

PTFE/硅橡膠
PTFE/硅橡膠/PTFE
PTFE/紅色橡膠
溫度范圍
-40℃-200℃
-40℃-200℃
-40℃-90℃
用于多次進(jìn)樣
不能
價(jià)格
經(jīng)濟(jì)
昂貴
非常經(jīng)濟(jì)
耐穿性
優(yōu)異
優(yōu)異
推薦用于樣品儲(chǔ)存
不能
最適用于
大多數(shù)常用HPLC和GC分析,耐穿性不如P/S/P
卓越性能滿足超痕量分析,重復(fù)進(jìn)樣及內(nèi)標(biāo)需求
氯硅烷,單次進(jìn)樣更經(jīng)濟(jì)的選擇

6、隔墊與樣品和溶劑的兼容性
隔墊化學(xué)兼容性

PTFE
PTFE/硅橡膠
PTFE/硅橡膠/PTFE
PTFE/紅色橡膠
乙腈
烴類(己烷、庚烷、甲烷)

甲醇


四氫呋喃


甲苯


二甲基甲酰胺(DMF)

二甲基亞砜(DMSO)

乙醚

氯代溶劑(二氯甲烷)


乙醇
乙酸

丙酮

苯酚

環(huán)己烷


*PTFE/硅橡膠/PTFE隔墊與PTFE隔墊具有相同的化學(xué)兼容性,直至被刺穿
一次性針式過濾器 


+

選擇不同種類的針式過濾器對(duì)流動(dòng)相及樣品進(jìn)行過濾達(dá)到澄清除菌、去除雜質(zhì)顆粒的作用。對(duì)保護(hù)色譜系統(tǒng)及色譜柱具有重要意義。 
針式濾器的選擇主要可以從以下三個(gè)方面進(jìn)行考量:外殼、規(guī)格,以及濾膜。   
1、外殼
一般外殼為高壓聚丙烯(PP),耐高溫,不泄漏,不需換膜和清洗,省去繁雜費(fèi)時(shí)的準(zhǔn)備工作,是過濾HPLC、GC小量樣品首選產(chǎn)品。   
 
2、規(guī)格
直徑:常用Φ13mm、Φ25mm、Φ33mm三種。即樣品量2-10ml選用Φ13μm,樣品量10-100ml選用Φ25μm,大于100ml選用Φ33μm。 
孔徑:0.22μm、0.45μm

3、濾膜的特性及應(yīng)用 
(1)水系膜(混合纖維素酯CN-CA)
特性:孔徑均勻、孔隙率高、無介質(zhì)脫落、質(zhì)地薄、阻力小、濾速快、成本低,但不耐有機(jī)溶液及強(qiáng)酸強(qiáng)堿。 
應(yīng)用:飲用水、地表水、井水等除菌過濾溶液中微粒及油類不溶物的分析、水質(zhì)污染指數(shù)測(cè)定、氣體、油類、飲料、酒等微粒和細(xì)菌過濾。為前處理過濾中最為廣泛使用的濾膜之一。 

(2)尼龍膜(聚酰胺NYLON) 
特性:耐溫性能好、可耐121°C、飽和蒸汽高壓消毒30分鐘、最高工作溫度60°C,化學(xué)穩(wěn)定性好,能耐稀酸稀堿等多種有機(jī)無機(jī)化合物、溶劑。 
應(yīng)用:適用于電子、微電子、半導(dǎo)體工業(yè)水過濾組織培養(yǎng)基、藥液、飲料、高純化學(xué)品、水及有機(jī)溶液流動(dòng)相的過濾。 

(3)PVDF膜(聚偏氟乙烯)
特性:膜機(jī)械強(qiáng)度高、抗張強(qiáng)度好、具有良好的耐熱性及化學(xué)穩(wěn)定性、蛋白吸附極低、具較強(qiáng)的疏水性。 
應(yīng)用:氣體及蒸汽過濾、高溫液體過濾、組織培養(yǎng)基、添加劑等除菌過濾、溶劑和化學(xué)原料凈化過濾。 

(4)PTFE(聚四氟乙烯) 
特性:具有廣泛的化學(xué)兼容性、耐溫性好、抗強(qiáng)酸強(qiáng)堿、化學(xué)腐蝕性較強(qiáng)的溶劑及氧化劑。 
應(yīng)用:化工、醫(yī)藥、環(huán)保、電子、食品、能源等領(lǐng)域,幾乎能過濾所有的有機(jī)溶液。 
 
編輯:songjiajie2010

 
分享:
[ 網(wǎng)刊訂閱 ]  [ 儀器設(shè)備搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關(guān)閉窗口 ] [ 返回頂部 ]
 

 
 
推薦圖文
推薦儀器設(shè)備
點(diǎn)擊排行
 
 
Processed in 0.016 second(s), 19 queries, Memory 0.99 M