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掃描電鏡制樣中要注意的問題

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-11-22  來源:飛納電鏡
核心提示:掃描電鏡在觀察生物樣品時(shí),具有以下特點(diǎn):(1)多角度觀察樣品的表面結(jié)構(gòu);(2)不需要將樣品切成薄片;(3)景深大、圖像立體感

掃描電鏡在觀察生物樣品時(shí),具有以下特點(diǎn):
(1)多角度觀察樣品的表面結(jié)構(gòu);
(2)不需要將樣品切成薄片;
(3)景深大、圖像立體感強(qiáng);
(4)放大倍數(shù)從幾十倍到幾十萬倍連續(xù)可調(diào);
在觀察形貌的同時(shí)可以對(duì)微區(qū)的成分進(jìn)行定量和定性分析。而能否獲得真實(shí)、清晰、理想的掃描電鏡觀察結(jié)果,樣品的制備過程是關(guān)鍵。

生物樣品含水直接觀察,會(huì)對(duì)掃描電鏡造成以下影響:
1.  樣品蒸發(fā)的水蒸氣遭遇高能電子束,會(huì)被電離而放電,引起束流大幅度波動(dòng),使圖像模糊,或者根本不能成像;
2.  大多數(shù)含水樣品在高真空中容易發(fā)生形態(tài)損傷,表面皺縮、變形; 
3.  樣品揮發(fā)會(huì)造成鏡頭、光闌等的污染; 
4.  燈絲會(huì)被上升水蒸氣氧化而變質(zhì)。
生物樣品的含水量高,二次電子產(chǎn)率低,導(dǎo)電性差,對(duì)熱,電子束敏感,僅有少數(shù)樣品如毛發(fā)、牙齒以及含水量極低的昆蟲等可以直接噴鍍觀察,絕大多數(shù)的生物樣品均要求經(jīng)過干燥處理才能鍍金觀察。
干燥是掃描電鏡生物樣品制備中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),如果處理不好,會(huì)直接影響到觀察的清晰度與準(zhǔn)確度。要想制備出好的掃描電鏡生物樣品,需要在干燥過程中盡可能減少由于水分蒸發(fā)而引起的樣品表面形貌的形變,且必須確保干燥。大多數(shù)動(dòng)植物容易發(fā)生明顯的塌陷和變形。因此,需要針對(duì)不同的生物樣品來選擇合適的干燥方法。

編輯:songjiajie2010

 
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