菌種試驗用菌株的傳代次數(shù)不得超過5代(從菌種保藏中心獲得的干燥菌種為第0代),并采用適宜的菌種保藏技術(shù)進行保存,以保證試驗菌株的生物學特性。
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC(B)26 003〕
銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC(B)10 104〕
大腸埃希菌(Escherichia coli)〔CMCC(B)44 102〕
白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC(F)98 001〕
生孢梭菌(Clostridium sporogenes)〔CMCC(B)64 941〕
乙型副傷寒沙門菌(Salmonella paratyphi B)〔CMCC(B)50 094〕
2.1金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物置于TSA上或TSB中,30-35℃,培養(yǎng)18-24h。
2.2生孢梭菌的新鮮培養(yǎng)物置于FTM中,30-35℃,培養(yǎng)18-24h。
2.3白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物置于SDA上,20-25℃,培養(yǎng)2-3天。
2.4黑曲霉菌的新鮮培養(yǎng)物置于SDA上,20-25℃,培養(yǎng)5-7天,或直到活的豐富的孢子,用0.05%聚山梨酯的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉將孢子洗脫,然后,吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi),用0.05%聚山梨酯的PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或0.9%無菌氯化鈉制成適宜濃度的菌懸液。
2.5菌液制備后若在室溫下放置,應(yīng)在2小時內(nèi)使用;若保存在2~8℃,可在24小時內(nèi)使用。生孢梭菌孢子懸液可替代新鮮的菌懸液,孢子懸液可保存在2~8℃,在驗證過的貯存期內(nèi)使用。
為確認試驗條件是否符合要求,應(yīng)進行陰性對照試驗,陰性對照試驗應(yīng)無菌生長。如陰性對照有菌生長,應(yīng)進行偏差調(diào)查。
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