1.設(shè)定移液體積
從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)刻度即可。從小量程調(diào)節(jié)至大量程時,應(yīng)先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證移液器的精確度。
2.裝配移液槍頭
將移液槍垂直插入吸頭,左右旋轉(zhuǎn)半圈,上緊即可。用移液器撞擊吸頭的方法是非常不可取的,長期這樣操作會導(dǎo)致移液器的零件因撞擊而松散,嚴重會導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。
3.吸液及放液
垂直吸液吸頭浸入液面3mm以下,吸液前槍頭先在液體中預(yù)潤洗慢吸慢放;放液時如果量很小則應(yīng)吸可靠容器內(nèi)壁。
4.吸有液體的移液槍不應(yīng)平放,槍頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可能導(dǎo)致槍的彈簧生銹。
5.移液槍在每次實驗后應(yīng)將刻度調(diào)至最大,讓彈簧恢復(fù)原型以延長移液槍的使用壽命。
6.吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
7.為獲得較高的精度,吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
8.濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設(shè)定。
9.可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g。所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝置,損壞移液器。
10.在設(shè)置量程時,請注意:數(shù)字清清楚楚在顯示窗中,旋轉(zhuǎn)到所需量程。
11.移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。
12.不要用大量程的移液器移取過小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作。
一般來說,為防止所吸取體積上出現(xiàn)誤差,有一些基本的操作原則必須遵守。
對吸取體積誤差影響的因素主要有三個方面:
①流體靜壓,在吸取液體時,加樣器吸頭只能浸入液體幾毫升以確保與排出液體時相同的流體靜壓條件,因此,加樣器必須以幾乎垂直的方式加取液體,因為傾斜的方式將減少液體柱的高度,導(dǎo)致吸取的液體過多。如果加樣器在30℃下以垂直方式吸取液體,可吸取至0.15%更多的液體。
②吸頭潤濕,當(dāng)吸頭排空時,仍會有一些殘留的液體以薄膜形式保留在吸頭的側(cè)面,其量取決于液體和吸頭表面的相互作用,因此,其是一個常數(shù),但依液體材料的不同而不同。對于水溶液,這種潤濕影響在構(gòu)建加樣器時就應(yīng)考慮。對于蛋白溶液等黏度高的液體,建議在加樣前吸打液體數(shù)次,以保證加樣的一致性。
③流體動力學(xué),對體積吸取的第三個影響是從加樣器吸頭外壁液體的釋放,在此過程中,吸頭的幾何形狀起一個關(guān)鍵的作用。為確保加樣中的穩(wěn)定條件,加樣器吸頭應(yīng)靠在管壁上,于是,液體可順著管壁流出,而不出現(xiàn)液滴,液滴的形成可由于其表面張力的作用而阻止液體從吸頭中釋放。如果吸頭安裝不正確或使用不相配的吸頭,相對加樣誤差將達到0.4%以上。