插入突變已經(jīng)成為眾多物種的功能基因組學研究中的核心方法。在小鼠中,改良的載體和方法使得我們更為簡便地,在基因組范圍內(nèi)依據(jù)表型進行插入突變(insertional mutagenesis)篩選。如果我們能制作等位基因都突變的小鼠胚胎干細胞,就可以在體內(nèi)分析之前就提前篩選到具有特殊無義突變的表型(specific null phenotype)。另外,在脊椎動物中發(fā)現(xiàn)的活躍的轉(zhuǎn)座元件(transposable element),以及由此開發(fā)出來的遺傳學工具,促進了在小鼠體內(nèi)正向插入突變篩選基因的應用。這些新技術將會大大加快我們徹底解析小鼠基因組的步伐。
(插入突變策略和機制)
(胚胎干細胞的表達捕獲法)
P, promoter; pA, polyadenylation signal; SA, splice acceptor; SD, splice donor; nitroreductase, NTR; RACE, rapid amplification of cDNA ends。
(小鼠插入突變工具的比較)
(基因捕獲方法)
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INSERTIONAL MUTAGENESIS IN MICE: NEW PERSPECTIVES AND TOOLS. Nature Reviews Genetics 6, 568-580 (2005)