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沉淀反應(precipitation)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-09-16
    一種血清學反應。可溶性抗原與相應抗體結合,在有適量電介質(zhì)存在下,經(jīng)過一定時間,形成肉眼可見的沉淀物。沉淀反應的抗原可以是多糖、蛋白質(zhì)、類脂等。同相應抗體比較,抗原的分子小,單位體積內(nèi)含有的抗原量多,做定量試驗時,為了不使抗原過剩,應稀釋抗原,并以抗原的稀釋度作為沉淀反應的效價。習慣上將參與沉淀反應的抗原稱為沉淀原,抗體稱沉淀素。沉淀反應的實驗方法大體可分為環(huán)狀法、絮狀法、瓊脂擴散法三種基本類型。

  環(huán)狀沉淀反應 又稱環(huán)狀試驗。主要用于抗原的定性試驗。用已知抗體來檢測未知抗原。在小口徑試管中先加入已知抗血清,然后將待檢抗原小心地加在血清的表面,成為界面清晰的兩層。數(shù)分鐘后,兩界面交界處出現(xiàn)白色沉淀環(huán),為陽性反應。本試驗常用做抗原定性,如炭疽的診斷(Ascoli氏試驗)、鑒別血跡、媒介昆蟲的嗜血性等。

  絮狀沉淀反應 將抗原與相應抗體在試管內(nèi)或凹玻片上混勻,如出現(xiàn)肉眼可見的絮狀沉淀物,為陽性反應。如診斷梅毒的康氏反應(Kahntest)。

  瓊脂擴散試驗 利用可溶性抗原與抗體在半固體瓊脂內(nèi)進行擴散,若抗原與抗體對應,并且比例適當,就會出現(xiàn)白色沉淀線,此為陽性反應。瓊脂擴散試驗可在試管內(nèi)、平皿中以及玻片上的瓊脂中進行。又可分為單向瓊脂擴散試驗和雙向瓊脂擴散試驗兩類。

  單向瓊脂擴散試驗 是一種常用的定量檢測抗原的方法。將適量抗體與瓊脂混勻,澆注成板,凝固后,在板上打孔,孔中加入抗原,抗原就會向孔的四周擴散,邊擴散邊與瓊脂中的抗體結合。一定時間后,在兩者比例適當處形成白色沉淀環(huán)。沉淀環(huán)的直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原制成標準曲線,則從曲線中可求出標本中抗原的含量。本試驗主要用于檢測標本中各種免疫球蛋白和血清中各種補體成分的含量,敏感性很高。

  雙向瓊脂擴散試驗 是將半固體瓊脂傾注于平皿內(nèi)或玻片上,待其凝固后,在瓊脂板上打孔,將抗原、抗體分別注入小孔內(nèi),使兩者相互擴散。如果抗原、抗體相互對應,濃度、比例適當,則一定時間后,在抗原、抗體孔之間出現(xiàn)清晰可見的沉淀線。雙向瓊脂擴散法可用來分析溶液中的多種抗原。一對抗原、抗體系統(tǒng)只能形成一條沉淀線,不同的抗原抗體系統(tǒng)在瓊脂中擴散的速度不同,可在瓊脂中形成不同的沉淀線。本法主要是用于檢測血清中各種免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙肝表面抗原等。缺點是需要時間過長,靈敏度不高。

 
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