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HM42 沙門氏菌乳膠凝集試劑盒(HM42 HKM® SALMONELLA)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2010-08-04  來源:食品伙伴網整理
核心提示:沙門氏菌乳膠凝集檢測試劑用于確證鑒定選擇性平板上分離出的可疑菌落。

一、用途

沙門氏菌乳膠凝集檢測試劑用于確證鑒定選擇性平板上分離出的可疑菌落。該試劑盒僅供專業(yè)人員使用。

 

二、原理

乳膠顆粒表面包被與沙門氏菌特異性抗原具有特異性的多價抗血清。與沙門氏菌菌懸液混合后,乳膠顆?裳杆倌。HKM®沙門氏菌乳膠凝集試劑盒可檢測99%以上的有動力的沙門氏菌和特定的無動力沙門氏菌。

 

三、試劑盒組成成分

REAG TEST  測試試劑 HM42a 沙門氏菌乳膠試劑 2.5mL

乳膠顆粒包被沙門氏菌抗原相應的兔抗血清。含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。(藍色瓶蓋)

CONTROL +  陽性對照試劑 HM42b 陽性對照  0.5mL

無活性的沙門氏菌抗原,含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。(黑色瓶蓋)

NaCl 0.85%   0.85%鹽水 HM40 0.85%生理鹽水 5.0mL

0.099%的疊氮化鈉防腐劑。(白色瓶蓋)

 

使用說明書

檢測板

攪拌棒

 

需要的其它材料

l      接種環(huán)

l      移液器

 

四、警告和注意事項

安全:

1、試劑僅供體外診斷使用。

2、試劑盒作防腐劑使用的疊氮化鈉可與鉛或銅制品反應形成易爆的金屬疊氮化物?捎么罅克疀_洗以避免疊氮化物的堆積。

3、在處理或檢測可疑致病菌時應采取適當的預防措施。被污染的物品可用3%的次氯酸鈉消毒處理30分鐘。含酸的廢液應作中和處理。

4、陽性對照液在生產中已作惰性處理,但在使用中依然應小心處理。

 

檢測過程:

1、試劑盒應按說明書使用。

2、所有試劑在使用前應達到室溫。

3、不要稀釋試劑盒內的任何試劑

4、不要混合不同批次試劑盒的試劑。

5、不要冷凍試劑盒內的試劑。

6、不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到陽性對照試劑或細菌樣品。

7、注意凝集狀態(tài),呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實凝集。

8、使用前應確保檢測板清潔干燥。

 

五、貯存及保質期

檢測試劑盒不使用時應貯存在28℃,并應在包裝盒標簽上的有效期內使用檢測試劑。

 

六、樣本

可檢測選擇性分離平板上的沙門氏菌可疑菌落。

 

七、檢測過程

質量控制:

在每次使用檢測試劑盒前應作下列質量控制檢測,以確證試劑的有效性。

1、檢測試劑的控制:滴1滴測試試劑(HM42a)1滴生理鹽水(HM40)于同一個測試反應環(huán)內,用攪拌棒在整個區(qū)域內混勻液體,輕搖檢測板2分鐘并觀察是否會出現凝集。如果出現凝集反應,表明檢測試劑或生理鹽水受到污染,應廢棄處理。

2、陽性對照的控制:滴1滴陽性對照試劑(HM42a)1滴測試試劑(HM42a)于同一個測試反應環(huán)內,不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到陽性對照試劑。用攪拌棒在整個區(qū)域內混勻液體,輕搖檢測板2分鐘,應觀察到凝集反應。如果未出現凝集反應,應采用新鮮的檢測試劑盒。

 

測試程序:

1、滴1滴生理鹽水(HM40)于檢測板的一個反應環(huán)內。

2、用接種環(huán)從選擇性分離平板上挑取可疑菌落,與反應環(huán)內的生理鹽水混合,形成均勻的混濁的菌懸液。

3、輕搖檢測板2分鐘,觀察是否會出現自動凝集現象。如果菌懸液保持均勻狀態(tài),繼續(xù)第4步。

4、搖勻乳膠測試試劑后,滴1滴于已滴加菌懸液的反應環(huán)內,不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到菌懸液。

5、用1支干凈的攪拌棒混勻菌懸液和測試試劑,輕搖檢測板23次,在2分鐘內觀察凝集結果。

6、記錄結果后,將攪拌棒和檢測板進行適當的消毒處理。

 

八、結果說明

2分鐘內出現凝集,表明樣品中有沙門氏菌,如不出現凝集,表明測試菌落中無沙門氏菌。

 

九、使用的局限性

1、結果應依據所有的臨床或實驗室信息進行判斷。

2、沙門氏菌的粗糙菌株可在生理鹽水中形成非特異性自動凝集,因此不可用乳膠試劑盒檢測。

3、不能檢測部分無動力沙門氏菌。

4、有些氧化酶陽性菌株可能引起假陽性凝集結果。

5、保存較長時間的腸桿菌科的營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物可引起非特異性凝集,而保存時間過長的沙門氏菌可能出現假陰性結果。因此檢測菌株應為新鮮培養(yǎng)物。

6、乳膠凝集檢測為初步鑒定結果,所有的陽性結果的純培養(yǎng)物應作進一步的鑒定分析和血清分型。

 

十、檢測效果對比

HKM® 沙門氏菌乳膠試劑盒與一種已廣泛使用的商業(yè)化的乳膠試劑盒檢測效果對比,用二種產品檢測126株沙門氏菌和58株潛在交叉反應的菌株。

 

 

HKM®

總計

陽性

陰性

另一已廣泛使用的乳膠試劑盒

陽性

135**

1

136

陰性

0

48***

48

總計

135

49

 

靈敏度 135/13699.3%

特異性 48/48100%

一致性 183/18499.5%

1一個樣品在HKM®檢測試劑中呈陰性結果,在對比檢測試劑中呈可凝結果。樣品最終鑒定為bergen沙門氏菌

**135株分離菌株中,11株在2種試劑盒均存在交叉反應。它們分別為:差異檸檬酸桿菌1株、鮑氏不動桿菌2株、斯氏普羅威登氏菌1株、蠟樣芽孢桿菌2株、金黃色葡萄球菌4株、鏈球菌1株。以上所有交叉反應的菌株中,均不會在沙門氏菌選擇性分離平板上生長或生長時菌落呈現非典型的沙門氏菌菌落形態(tài)。蠟樣芽孢桿菌凝集時為非典型凝集,(呈纖維狀。)

***1株都伯林沙門氏菌在二種試劑盒均重復性的出現陰性結果。

 

十一、重復性

批內重復性:通過以系列稀釋度的參照抗原和試劑盒對照抗原及一組34個細菌樣品盤對同1批產品的靈敏度和特異性進行檢測。由不同的操作者隨機測試3次,最終效價由參照/對照抗原測定,并且3次定性分析結果完全一致。

批間的重復性:通過以系列稀釋度的參照抗原和試劑盒對照抗原及一組34個細菌樣品對3批產品的靈敏度和特異性進行檢測。3個批次間,最終效價無顯著差異及定性分析結果為100%一致性。

廣東環(huán)凱微生物科技有限公司  電話:020-32077703
編輯:foodnews

 
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