高效液相色譜儀分析中保留時間不重現(xiàn)的可能原因:
1 確認流動相是否新鮮配制的,比例有無錯誤。
2 確認色譜條件是否在色譜柱使用范Χ內,如pH范Χ、溫度和壓力。
3 仔細觀察柱前壓的變化。如果壓力穩(wěn)定,可以判斷泵系統(tǒng)û有問題。如果壓力不穩(wěn)定,通常是由于泵內有氣泡造成的,一定會影響保留時間。將流動相仔細脫氣,并排出泵內氣泡。
4 觀察色譜峰形和柱效變化情況,確認色譜柱是否被污染。如果色譜柱被污染,可使用適當溶劑沖洗。
5 如果同時伴有色譜柱柱壓升高,降低柱壓。
6 如果使用梯度洗脫,確認平衡時間是否足夠長。流動相中使用離子對試劑(烷基磺酸鈉等)或固定相為正相硅膠等往往需要更長的平衡時間。
7 確認樣品是否過載。
8 組分在色譜柱中保留不夠。調整色譜條件,使樣品在柱上適當保留。