1、報(bào)告基因檢測(cè)
報(bào)告基因的檢測(cè)是評(píng)價(jià)啟動(dòng)子調(diào)控效率和其中作用元件的有效方法.經(jīng)常使用的還有雙報(bào)告系統(tǒng): 同時(shí)向細(xì)胞中轉(zhuǎn)入兩種報(bào)告基因, 其中一種為待研究的啟動(dòng)子控制(熒火蟲熒光素酶),另一種為不被處理所影響的啟動(dòng)子控制(海腎熒光素酶)作為內(nèi)參,可消除系統(tǒng)誤差.
報(bào)告基因檢測(cè)的優(yōu)勢(shì):
• 減小隨機(jī)誤差
• 比率計(jì)算避免了系統(tǒng)誤差
• 超高的靈敏度 ( 極低的背景干擾)
• 動(dòng)力學(xué)范圍更廣
• 發(fā)光強(qiáng)度在4~6個(gè)數(shù)量級(jí)之間與測(cè)定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系
• 無(wú)需昂貴的設(shè)備投入
• 手段更為靈活
2、化學(xué)發(fā)光免疫分析
3、核酸定量 (PCR Quantification)
4、酶活分析
5、活性氧分析
6、BRET分析
主要用來(lái)研究分子間相互作用,如:
• 蛋白組學(xué)
–監(jiān)測(cè)蛋白-蛋白相互作用
–檢測(cè)胞內(nèi)細(xì)胞器間的相互作用
–在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中對(duì)酵母雙雜交結(jié)果的驗(yàn)證
• 受體研究
• 細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路研究