細胞周期檢測的原理:
PI法是經(jīng)典的周期檢測方法。PI為插入性核酸熒光染料,能選擇性的嵌入核酸DNA和RNA雙鏈螺旋的堿基之間與之結(jié)合,其結(jié)合的量與DNA的含量成正比例關(guān)系,用流式細胞儀進行分析,就可以得到細胞周期各個階段的DNA分布狀態(tài),從而計算出各個期的百分含量。PI染色后,假設(shè)G0/G1期細胞的熒光強度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細胞的熒光強度的理論值為2,正在進行DNA復(fù)制的S期細胞的熒光強度為1-2之間。
常用的細胞染色方法有:
1.簡單染色法,常用堿性染料如美藍等進行簡單染色;
2.革蘭氏染色法,主要包括結(jié)晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脫色以及番紅復(fù)染四個過程;
3.瑞氏染色法,瑞氏染料溶劑主要是由伊紅美藍組成;
4.吉姆薩染色法,吉姆薩染色原理與結(jié)果和瑞特染色法基本相同;
5.細胞免疫熒光染色法,免疫熒光染色的主要原理是利用抗原抗體之間的特異性結(jié)合。