由于實質(zhì)細胞比非實質(zhì)細胞的平均體積大10倍左右,所以采用差速離心可以從肝細胞懸浮液中分離出肝實質(zhì)細胞,但離心條件應(yīng)嚴格控制。
一般在4℃,低速離心(大約50g)15min就可使實質(zhì)細胞沉降到管底,通過反復(fù)洗沉淀再離心可以提高實質(zhì)細胞的純度。
如果離心力稍微增加,就會使非實質(zhì)細胞大量沉降到沉淀里。
在550g離心5min,可以回收非實質(zhì)細胞,它不含實質(zhì)肝細胞。
由于解離出的非實質(zhì)細胞容易凝聚,該法會丟失大量非實質(zhì)細胞,其中枯否氏細胞丟失15%~30%。