白愛琴
酵母細胞在高溫的刺激下,有些酵母不能忍受高溫環(huán)境,而早衰,或者死亡。本文用美蘭染色法觀察兩種釀酒酵母對于高溫的不耐受性。
1 菌種
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae )Y14(LYCD制備菌株),從茅臺酒生產(chǎn)酒醅中分離,最佳生長溫度為35-38℃,最高可達42℃;釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)MZT.39(生物活性測定菌株),中國微生物國家菌種保藏中心提供。
2培養(yǎng)基
麥芽汁液體培養(yǎng)基,12Brix.
麥芽汁固體培養(yǎng)基,12Brix的麥芽汁液體培養(yǎng)基中加入2%的瓊脂。
3 方法
美蘭染色法,美蘭染液的配制:次甲基藍0.01g,二水合檸檬酸三鈉2g, 用蒸餾水定容至100mL。
染色的步驟::取美蘭染液一滴,滴在載玻片上,然后取一滴刺激后的酵母Y14的培養(yǎng)液和染液混勻,染色2-3min后,蓋上蓋玻片在顯微鏡下觀察。
圖1,46℃下Y14和茅臺酒醅中的酵母染色
圖2,48℃下Y14和茅臺酒醅中的酵母染色
圖3,50℃下Y14和茅臺酒醅中的酵母染色
從三幅圖可以看出,高溫對Y14酵母細胞和茅臺酒醅中的酵母都有相似的毒副作用,且隨著溫度的升高,酵母死亡率越高。從圖片里還可以看到,酒醅里有很多其他的釀酒酵母類型,但是酵母細胞對溫度應激反應變化是相似的。