作為從事微生物檢測(cè)的一員,每天在實(shí)驗(yàn)室里,我們需要跟各種檢測(cè)方法、細(xì)菌真菌以及檢測(cè)設(shè)備等打交道,對(duì)微生物檢測(cè)領(lǐng)域也肯定會(huì)存在這樣或者那樣的問(wèn)題,面對(duì)這些問(wèn)題你是怎么解決的?你有哪些好的微生物檢測(cè)工作經(jīng)驗(yàn)?都可以在后臺(tái)給小編留言,我們一起聊聊。
轉(zhuǎn)眼間,(2016版)4789系列標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)實(shí)施近5個(gè)年頭啦,雖然還有一個(gè)GB/T 4789.3-2003頑強(qiáng)的存在著。今天和大家在一起聊聊我對(duì)4789系列國(guó)標(biāo)(常規(guī)微生物方面)的理解,純屬個(gè)人+他人觀點(diǎn),如有雷同,那就對(duì)了!
首先來(lái)談一下總則GB 4789.1,很多小伙伴“一入坑”就上手菌落總數(shù)、大腸菌群等衛(wèi)生指標(biāo)菌的檢測(cè),而忽視了這些檢驗(yàn)的基礎(chǔ)及原則,經(jīng)常會(huì)有微信群好友問(wèn)“n、c、m、M是什么意思”類(lèi)似的問(wèn)題,也看得到群里的大佬們的悉心解答,總感覺(jué)我們解答的人比他們自己都要急切地讓他們明白。
《GB 4789.1-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 總則》 理解
總則正文第一句話(huà),“本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品微生物學(xué)檢驗(yàn)基本原則和要求”,已經(jīng)很明確的告訴我們檢驗(yàn)基本原則和要求就在這,你們快來(lái)看吧!然后標(biāo)準(zhǔn)從基本要求、樣品采集、檢驗(yàn)、生物安全和質(zhì)量控制、記錄與報(bào)告、檢樣后處理幾個(gè)方面展開(kāi)了詳細(xì)的內(nèi)容。基本要求即為“人、機(jī)、料、法、環(huán)”五大要素,也是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的切入點(diǎn)。
樣品采集中規(guī)定了采樣方案,目前大多數(shù)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)也都規(guī)定選取三級(jí)采樣方案,為什么采取n、c、m等值呢,這是在跟國(guó)際接軌呀,雖然說(shuō)三級(jí)采樣使得化驗(yàn)員工作量增加了,但是要求更嚴(yán)格,企業(yè)為了更好的質(zhì)量更規(guī)范的生產(chǎn),也從另一反面增加了食品安全系數(shù)。然后就是檢驗(yàn)過(guò)程,對(duì)應(yīng)一系列的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)啦。
標(biāo)準(zhǔn)最后規(guī)定了“剩余樣品和同批產(chǎn)品不進(jìn)行微生物項(xiàng)目的復(fù)檢”,為什么呢,微生物的分部可謂極不規(guī)則,即使是同一樣品的不同部位,也無(wú)法保證它微生物檢驗(yàn)的重復(fù)性,更何況是不同的樣品呢,故而即使復(fù)檢,所得結(jié)果也不具有參考價(jià)值。
《GB 4789.2-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》理解
然后來(lái)看GB 4789.2,作為大多數(shù)產(chǎn)品的衛(wèi)生指示菌,菌落總數(shù)的測(cè)定相信是很多新手的“第一道菜”。除了總則規(guī)定的基本要求外,此標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了檢驗(yàn)程序,檢驗(yàn)設(shè)備,計(jì)數(shù)方法和報(bào)告方式等。
檢驗(yàn)程序估計(jì)大家都能倒背如流了,就不多贅述了,主要說(shuō)說(shuō)個(gè)人對(duì)這幾點(diǎn)的理解。制備梯度稀釋液時(shí),磷酸鹽緩沖液可以更好得調(diào)節(jié)樣液的pH,減少樣液pH的不穩(wěn)定帶來(lái)的影響。
然后是培養(yǎng),一般要求實(shí)驗(yàn)開(kāi)始到傾注平板在15min內(nèi)進(jìn)行,可有效減少污染;還有,如果某個(gè)產(chǎn)品做出來(lái)總是有菌落蔓延的情況,那么可以采用二次覆蓋法來(lái)避免此類(lèi)情況。
最后,計(jì)數(shù)和報(bào)告,規(guī)定選取菌落數(shù)在30-300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),例如,10倍和100倍稀釋度平板菌落數(shù)分別為271,283,25,34,結(jié)果計(jì)算式為(271+283+34)/【(2+0.1*1)*10-1】。報(bào)告方式,微生物檢驗(yàn)均采取“四舍五入”的修約規(guī)則,小于100時(shí),以整數(shù)報(bào)告,大于100時(shí)以科學(xué)計(jì)數(shù)法保留兩位有效數(shù)字,或修約后取前兩位,其余以0代替。
《GB4789.3-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)》 理解
接著來(lái)看同為衛(wèi)生指標(biāo)菌——大腸菌群的檢測(cè)GB4789.3,在以往的MPN法外又增加了平板計(jì)數(shù)法,由于公司產(chǎn)品大多采用平板計(jì)數(shù)法,所以探討下平板計(jì)數(shù)及證實(shí)試驗(yàn)的細(xì)節(jié)。
梯度稀釋,同菌落總數(shù),傾注VRBA培養(yǎng)后續(xù)觀察菌落特征進(jìn)行證實(shí)試驗(yàn),BGLB肉湯管產(chǎn)氣即可報(bào)告為陽(yáng)性,一般伴隨產(chǎn)氣,還會(huì)有沉淀、液面有漂浮小氣泡的現(xiàn)象。
關(guān)于接種挑菌的說(shuō)法,參加過(guò)多次培訓(xùn),也是各執(zhí)己見(jiàn),分享下比較認(rèn)可的其中一種:分別計(jì)數(shù)某稀釋度2個(gè)平皿的典型菌落和可疑菌落數(shù),每個(gè)平皿都挑取10個(gè)菌進(jìn)行接種,10個(gè)菌的選取按典型和可疑菌落的比例進(jìn)行,如典型:可疑為21:46,則挑取比例為:3:7。復(fù)發(fā)酵后分別計(jì)算兩個(gè)平皿的結(jié)果,再求取平均值作為該稀釋度的大腸菌群報(bào)告值。
好了,今天的分享就到這里,文章觀點(diǎn)只是個(gè)人的建議,僅供參考。同時(shí)歡迎小伙伴們踴躍投稿,分享自己在檢測(cè)過(guò)程中的經(jīng)驗(yàn)。
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