1.原材料

a. 培養(yǎng)基原料：用于制備預(yù)制平皿的干粉培養(yǎng)基，對(duì)于輻照后微生物促生長能力和凝膠強(qiáng)度具有特殊的要求。所以需要對(duì)每一批用于預(yù)制平皿生產(chǎn)的原料都需要進(jìn)行篩選，選擇品質(zhì)優(yōu)良且性狀相近的原料，以確保終產(chǎn)品批間差異。

b.培養(yǎng)基制備用水需符合純化水的要求。

2.培養(yǎng)基制備

對(duì)于即用型培養(yǎng)基而言，無菌水平代表了產(chǎn)品的質(zhì)量狀況，是培養(yǎng)基質(zhì)量控制的關(guān)鍵性指標(biāo)。無菌水平需要綜合的過程控制，不單單依賴最終的輻照滅菌。

培養(yǎng)基的制備和滅菌一般采用培養(yǎng)基制備器一體化操作，pH調(diào)節(jié)是一個(gè)很關(guān)鍵步驟，需綜合考慮滅菌和輻照pH的變化量。滅菌條件一般為121℃15min，一般在此滅菌條件下微生物繁殖體及芽胞能夠被完全殺滅。已配制好的培養(yǎng)基應(yīng)在盡可能短的時(shí)間內(nèi)滅菌，避免微生物生長繁殖，導(dǎo)致微生物負(fù)載偏高，影響滅菌效果；而且微生物生長繁殖會(huì)消耗養(yǎng)分，同時(shí)代謝會(huì)產(chǎn)生物質(zhì)可能導(dǎo)致培養(yǎng)基pH值變化。因此，培養(yǎng)基滅菌溫度和時(shí)間必須嚴(yán)格控制，且不可重復(fù)滅菌。

3.分裝

滅菌后的培養(yǎng)基待到分裝溫度時(shí)，通過灌裝系統(tǒng)分裝到無菌平皿中，整個(gè)過程需要關(guān)注平皿接觸環(huán)境的為生物負(fù)載，一般在局部A級(jí)環(huán)境下進(jìn)行。在這個(gè)過程中，風(fēng)速和履帶速度需要格外關(guān)注，這個(gè)環(huán)節(jié)可能影響瓊脂凝固速度和表面干燥程度。

工作人員應(yīng)工裝整齊、潔凈、個(gè)人衛(wèi)生符合要求，要有很強(qiáng)的無菌意識(shí)。對(duì)于挑揀平皿包裝的崗位，定時(shí)關(guān)注手套手指、衣物關(guān)鍵區(qū)域的微生物情況是很關(guān)鍵的，這個(gè)環(huán)節(jié)交叉污染可能性增大，所以崗位操作流程及注意事項(xiàng)需要定期培訓(xùn)，手部、環(huán)境消殺及監(jiān)控程序需重點(diǎn)關(guān)注。

4.輻照滅菌

輻照滅菌主要通過電磁輻射產(chǎn)生的能量波或粒子束來破壞微生物的遺傳分子（DNA）或生物活性分子，同時(shí)通過電離輻射產(chǎn)生自由基，使生物活性分子變性失活產(chǎn)生殺菌作用。但是輻照滅菌同時(shí)會(huì)產(chǎn)生大量的自由基，很容易使培養(yǎng)基的酸堿度發(fā)生變化，對(duì)含有酸堿指示劑、還原性組分（如維生素C）的培養(yǎng)基通常不能進(jìn)行輻照滅菌。

以TSA/SDA為例，分包好的預(yù)制平板需要經(jīng)過終端輻照滅菌（鈷60），以確保最終的微生物負(fù)載符合要求。輻照滅菌一般在輻照中心進(jìn)行，平板生產(chǎn)企業(yè)對(duì)于輻照中心的輻照劑量控制顯得非常重要，需要自己定期進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以確保實(shí)際輻照劑量達(dá)到工藝設(shè)計(jì)要求且均一性符合要求，這樣才能確保既能有效殺滅殘存的微生物，又要保證培養(yǎng)基中的營養(yǎng)組分含量保持穩(wěn)定。

5. 包裝

預(yù)制平皿的包裝應(yīng)嚴(yán)格密封,且不易破損，以避免產(chǎn)品在運(yùn)輸過程中被環(huán)境微生物所污染。醫(yī)藥行業(yè)環(huán)境監(jiān)測(cè)用預(yù)制平皿一般采用三層包裝：

外層包裝：強(qiáng)韌的包裝材質(zhì)避免運(yùn)輸過程中的包裝破損，外層包裝無滲透性；

中層包裝：在指定位置剝除并拋棄，將裝有內(nèi)層包裝的平板轉(zhuǎn)移到潔凈區(qū)域；

內(nèi)層包裝：在潔凈區(qū)域剝除并拋棄內(nèi)層包裝，就可以直接使用。

同時(shí)內(nèi)置轉(zhuǎn)移袋，便于實(shí)驗(yàn)后轉(zhuǎn)移。

6. 質(zhì)量控制

理化指標(biāo)

（1）感官性狀：培養(yǎng)基應(yīng)透明無雜質(zhì)；

（2）pH值：除特殊說明外，pH 應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn) pH ± 0.2 范圍內(nèi)。

（3）凝膠強(qiáng)度：凝膠的穩(wěn)定性、粘稠度和濕度適宜，一般以劃線接種時(shí)培養(yǎng)基不被劃破為宜。

微生物指標(biāo)

（1）無菌性檢查

從每批制備好的培養(yǎng)基中抽取部分培養(yǎng)基進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)：將培養(yǎng)基于合適條件下培養(yǎng)一定時(shí)間，觀察有無菌落生長。若發(fā)現(xiàn)微生物污染，則該批培養(yǎng)基不符合要求且進(jìn)行偏差調(diào)查。

（2）適用性

使用標(biāo)準(zhǔn)菌株按照規(guī)程和標(biāo)準(zhǔn)的要求對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行適用性檢查，確保培養(yǎng)基符合藥典或者相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。