指在微生物實驗工作中,控制或防止各類微生物的污染及其干擾的一系列操作方法和有關(guān)措施。
(二)無菌環(huán)境
無菌室
無菌柜
超凈工作臺
1、無菌室
(1)無菌室的結(jié)構(gòu):更衣間、緩沖間、操作間
(2)無菌室的消毒和防污染
每日(使用前)紫外線照射(1~2小時).
每周用甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸(2小時).
每月用新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。
2、超凈工作臺
超凈臺的使用與保養(yǎng):
(1)風(fēng)速保持在0.32-0.48米/秒;
(2)使用前開啟紫外燈照射30分鐘以上;
(3)讓超凈臺預(yù)工作10~15分鐘;
(4)使用完畢后,用70%酒精將臺面和臺內(nèi)四周擦拭干凈.
(三)無菌器材
滅菌器材:玻璃器皿、培養(yǎng)基、無菌衣等.
消毒器材:無菌室內(nèi)的凳子、試管架、天平、工作臺、手等
(四)無菌操作
1、目的:
(1)是保證待檢物品不被環(huán)境中微生物的污染;
(2)是防止被檢微生物在操作中污染環(huán)境或感染操作人員。
2、進入無菌室前的準備
(1)定期檢查無菌環(huán)境的空氣是否符合規(guī)定;
(2)用紫外線滅菌處理30~60分鐘;
(3)檢查無菌器材是否完備;
(4)洗手消毒;
(5)手部消毒后,再穿戴無菌工作服。
3、檢驗操作過程的無菌操作要求
(1)在操作中不應(yīng)有大幅度或快速的動作;
(2)使用玻璃器皿應(yīng)輕取輕放。
(3)在正火焰上方操作;
(4)接種用具在使用前、后都必須灼燒滅菌;
(5)在接種培養(yǎng)物時,協(xié)作應(yīng)輕、準。
(6)不能用嘴直接吸吹吸管。
(7)帶有菌液的吸管、玻片等器材應(yīng)及時置于盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒。
斜面接種時的無菌操作
(1)接種滅菌 (2)開啟棉塞 (3)管口滅菌 (4)挑起菌苔 (5)接種 (6)塞好塞子